
Биофарминг В настоящее время под биофармингом чаще всего подразумевается использование генетически модифицированных растений, которые могут выращиваться в больших количествах для продуцирования сложных биологически активных молекул.
Использование системы аэропоники для получения целевых белков в корнях растения Архипенко М.В.1, Никитин Н.А.1, Мартиросян Ю.Ц.2, Карпова О.В1. 1МГУ имени М.В. Ломоносова, Биологический факультет 2ВНИИ сельскохозяйственной биотехнологии РАСХН Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript Предлагается технология агроинфицирования растений, культивированных в системе аэропоники, позволяющая получить продукцию ЦБ (целевых белков) в корнях растений, в том числе съедобных, на высоком уровне за короткий период времени. В работе были применены бинарные векторы, содержащие в своем составе копию самореплицирующегося вируса - вектора, продуцента целевых белков (ЦБ). Растения культивировали в универсальной аэропонной установке «Урожай» (биореактор), разработанной ВНИИ сельскохозяйственной биотехнологии РАСХН. Один биореактор состоит из четырех желобов, каждый из которых содержит 12 растений (всего 48 растений), урожайность биореактора 5 кг культуры корней за 3 недели Корни растения Brasica napus (рапс) инокулировали суспензией агробактерии с плотностью от 0,5 - 0,6 OD600, 1000 мл суспензии агробактерий добавляли в бак биореактора объемом 100 л с питательным раствором. Агробактерии содержали вирусный вектор (crTMV-GFP), полученный ранее на кафедре вирусологии биологического факультета МГУ, который был сконструирован на основе генома штамма вируса табачной мозаики, заражающего крестоцветные, с заменой гена белка оболочки целевым геном зеленого флуоресцентного белка – GFP (Green Fluorescent Protein). Наличие продукции целевого белка GFP в корнях рапса регистрировали по свечению в ультрафиолете при длине волны 365 нм на 7-10 день после агроинфильтрации, а также с помощью Вестерн-блот анализа. Определено, что количество целевого белка составляет 1,25 мг на 1 г биомассы корня. То есть, в результате одного цикла культивирования растений в системе аэропоники с последующим проведением агроинфильтрации агробактерий в растение in situ с использованием вирус-вектора может быть получено 6,5 г целевого белка за 3 недели.
|